【检验原理】
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源和微量元素,氯化钠可维持均衡的渗透压,十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌,琼脂是培养基凝固剂;混合色素分别与大肠菌群和大肠杆菌所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,使大肠菌群产生紫红色的菌落,大肠杆菌产生蓝绿色的菌落;大肠杆菌分解蛋白胨中的色氨酸,生成靛基质,与靛基质试剂作用,在大肠杆菌菌落周围形成玫瑰吲哚而呈红色。
【配方成分】
成分 | 含量(每升) | 成分 | 含量(每升) |
蛋白胨 | 10.0g | 琼脂 | 12.0g |
酵母膏粉 | 3.0g | 十二烷基硫酸钠 | 0.1g |
氯化钠 | 5.0g | 混合色素 | 2.7g |
蒸馏水 | 1000ml | 终 pH 7.0±0.2
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【使用方法】
平板凝胶培养基使用:待检样品按照相应的标准(GB、SN、FDA等)进行处理后,取适量样品液接种于该培养基上,于36±1℃培养18~24 h,观察结果;如需进行靛基质试验,则在可疑菌落上滴加一滴靛基质试剂后读取结果:靛基质试验阳性,菌落边缘显红色;靛基质试验阴性,菌落边缘不显红色。
脱水干粉培养基使用: 称取本品干粉32.8g,用1000mL蒸馏水或纯水溶解。混合均匀加热至100℃,并不断搅拌直至*溶解,无需灭菌,冷至50℃左右,备用。(注:配制不同用量体积,可按比例扩增或缩小。)后续操作可参考“平板凝胶培养基使用”。
瓶装凝胶培养基使用:将瓶装凝胶培养基置于100℃水浴中加热至*溶解,再冷至50℃左右,备用。
后续操作可参考“平板凝胶培养基使用”。
【质量控制】
1. 外观方面:
脱水干粉培养基:淡黄色粉末。
平板凝胶/瓶装凝胶培养基:淡黄色凝胶。
2. 生物学方面
下列质控菌株接种待测试培养基,36℃±1℃培养24h,结果如下:
质控菌株及编号 | 指标 | 质控评判标准 |
大肠杆菌ATCC25922 | 生长率 | PR≥0.7,蓝绿色菌落,滴加一滴靛基质试剂,菌落边缘显红色。 |
弗氏柠檬酸杆菌ATCC43864 |
| PR≥0.7,品(紫)红色菌落 |
鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028 | 特异性 | 生长良好,无色菌落。 |
粪肠球菌ATCC29212 | 选择性 | G≤1,受抑制 |
【储存条件及保质期】
脱水干粉:2-8℃,密封贮存,有效期两年。
平板凝胶/瓶装凝胶:2~8℃,避光保存,有效期三个月。
【注意事项】
1、称量脱水干粉培养基时避免粉尘扬起,以免吸入粉尘引起呼吸道系统不适。
2、凝胶培养基在2-8℃保存时与存放容器冷凝管保持一定距离以免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。使用前应平衡至室温。
3、质检报告下载:首先,登录环凯网站;然后,打开“客服中心”页面,点击“产品质检报告”,输入产品批号搜索即可。
【废物处理】
检测之后带菌器皿置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
【执行标准】
Q/HKSJ 03 普通微生物培养基