【检验原理】
蛋白胨和牛肉gao粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;胆盐抑制革兰氏阳性菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生;显色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷与阪崎肠杆菌中的α-葡萄糖苷酶发生反应,水解底物,释放出5-溴-4-氯-3-吲哚基显色基团,在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。
【配方】
阪崎肠杆菌显色培养基配方(每升):
蛋白胨 11g
牛肉gao粉 5g
氯化钠 5g
柠檬酸铁铵 1g
硫代硫酸钠 1g
胆盐 1.5g
5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g
琼脂 15g
终pH 7.3±0.2
【使用方法】
1. 取瓶内阪崎肠杆菌显色培养基干粉39.6克,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至*溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min;冷却至50℃,摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光,4℃)。
2. 取样品333克按MPN三管法分别取100克、10克和1克分装在各三个2000ml、250ml和100ml的三角瓶中,在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10(样品为1/10)的无菌蒸馏水或缓冲蛋白胨水,摇匀,在36℃培养18-22小时(SN和FDA方法)。
3. 各取10ml上述悬浮液加到装有90mlEE肉汤(022160)/mLST-Vm(022212)的150mL的三角瓶中,在36℃/44℃增菌培养18-22小时。
4. 用划线或涂布法把混匀的肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上,35-37℃培养18-24小时。
5. 可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验,对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。
【质量控制】
阪崎肠杆菌显色培养基质量控制:
本品倾注平皿后呈淡黄色,菌株接种后36±1℃培养18-24小时
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格:可配置1L的培养基干粉。
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